Los DC y CIK se generaron siguiendo los lineamientos de Buenas Prácticas de Manufactura. Se inyectó factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos humanos recombinante (rhGM-CSF) (150 μg) 24 horas antes de la extracción de sangre para movilizar los glóbulos blancos. Las PBMC se recolectaron de pacientes o donantes sanos utilizando un separador de células sanguíneas de flujo continuo COBE Spectra. Las PBMC concentradas se suspendieron inmediatamente en medio CIK X – VIVO 20, medio libre de suero, 50 ng/ml de anticuerpo anti-CD3, 1000 U/ml de IL-2 humana recombinante (rhIL-2) y 1000 U/ml de IFN-γ humano recombinante, a 37 °C con 5 % de CO2 y se alimentaron cada 5 días en medio completo fresco con varios tipos de citoquinas. Para el cultivo de DC, las PBMC se cultivaron en medio X-VIVO 20 que contenía 1.000 U/ml de IL-4 y 500 U/ml de rhGM-CSF. Se añadió lisado tumoral autólogo (100 μg/ml) el día 6 y se cultivó conjuntamente con CD durante 24 horas. Para la activación de CIK, las CIK se cultivaron conjuntamente con CD cargadas con antígeno tumoral durante 7 días. Las células DC-CIK se recogieron y analizaron para determinar su fenotipo, luego se suspendieron en 100 ml de solución salina para inyección intravenosa.